Picogreen荧光染料
LyGreen核酸染料是一种新型的的双链DNA结合饱和荧光染料,是新一代用于HRM分析的荧光染料,也可用于实时定量PCR(qPCR)。该染料结构上由两个单体染料分子通过一个弹性臂连接成一个二聚体,在没有DNA存在时,该结构呈无荧光环状结构,一旦有DNA出现,则恢复随机形态并与DNA结合发出强烈的绿色荧光。
与市场上其他荧光染料如SYBRGreenI相比,LyGreen具有如下优点:(1)灵敏度高:在推荐浓度下使用时可以获得比SYBRGreenI更强的信号(2)准确:结合双链DNA,变形时染料不迁移,荧光信号准确反映双链DNA变化情况。过量染料形成二聚体,而不游离,使得LyGreen对PCR的抑制远小于SYBRGreenI,因此,使用LyGreen进行的qPCR实验可以使用快速PCR步骤。(3)稳定性好:在正常的储存、操作和PCR过程中不会被破坏。在缓冲溶液中的染料可以安全的储存在室温或冰箱里,也可以反复冻融。(4)安全:细胞膜穿透性测试表明,LyGreen几乎不能穿透细胞膜。(5)兼容性:和SYBRGreenI光谱相似,使用不同品牌qPCR仪器时不需改变光谱元件设置,也无需改变操作步骤,qPCR完成后,无需加入其它核酸染料便能直接在凝胶成像系统下观察分析。(6)重复性好(如图1):特殊设计染料,相同反应体系下,荧光信号释放仅与双链浓度有关,优秀线性。
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